1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

 

彈性石英毛細管柱（30m×0.32mm×0.25μm）SE-54（或DB-1701）；63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度：230℃；檢測器溫度：300℃；不分流進樣。程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘。理論板數(shù)按α-BHC峰計算應不低于106，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

 

2、對照品儲備液的制備

 

精密稱取六六六（BHC）〔α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC〕、滴滴涕（DDT）〔PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT〕及五氯硝基苯（PCNB）農(nóng)藥對照品適量，用石油醚（60～90℃）分別制成每1ml約含4～5μg的溶液，即得。

 

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀釋至刻度，搖勻，即得。

 

3、混合對照品溶液的制備

 

精密量取上述混合對照品儲備液，用石油醚（60～90℃）制成每1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。

 

4、供試品溶液的制備藥材

 

取供試品于60℃干燥4小時，粉碎成細粉，取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，加丙酮40ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補足減失的重量，再加氯化鈉約6g及二氯甲烷30ml，稱定重量，超聲處理15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，靜置（使分層），將有機相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時，精密量取35ml，于40℃水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醚（60～90℃）如前反復操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚（60～90℃）溶解并轉移至10ml具塞刻度離心管中，加石油醚（60～90℃）至5ml，小心加入硫酸1ml，振搖1分鐘，離心（3000轉/分）10分鐘，精密量取上清液2ml，置具刻度的濃縮瓶（見圖）中，連接旋轉蒸發(fā)器，40℃下（或用氮氣）將溶液濃縮至適量，精密稀釋至1ml，即得。

 

5、制劑取供試品，研成細粉（蜜丸切碎，液體直接量取），精密稱取適量（相當于藥材2g），以下按上述供試品溶液制備法制備，即得供試品溶液。

 

6、測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標法計算供試品中9種有機氯農(nóng)藥殘留量。

 

二、有機磷農(nóng)藥殘留量測定

 

1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

 

彈性石英毛細管柱（30m×0.25mm×0.25μm）DB-17MS（或HP-5）；氮磷檢測器（NPD）；進樣口溫度：220℃；檢測器溫度：300℃；不分流進樣；程序升溫：初始120℃，每分鐘10℃升至200℃，每分鐘5℃升至240℃，保持2分鐘，每分鐘20℃升至270℃，保持0.5分鐘。理論板數(shù)按敵敵畏峰計算應不低于6000，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

 

2、對照品儲備液的制備

 

精密稱取對硫磷、甲基對硫磷、樂果、氧化樂果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷農(nóng)藥對照品適量，用醋酸乙酯分別制成每1ml約含100μg的溶液，即得。

 

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液1ml，置20ml棕色量瓶中，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，即得。

 

混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品儲備液，用醋酸乙酯制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的濃度系列，即得。

 

3、供試品溶液的制備藥材

 

取供試品粉末（過二號篩）5.0g，加無水硫酸鈉5g，加入醋酸乙酯50～100ml，冰浴超聲處理3分鐘，放置，取上層液濾過，藥渣加醋酸乙酯30～50ml，冰浴超聲處理2分鐘，放置，濾過，合并兩次濾液，用少量醋酸乙酯洗滌濾紙及殘渣，與上述濾液合并。取濾液40℃下減壓濃縮至近干，用醋酸乙酯轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱〔120～400目，0.25g，內(nèi)徑0.9cm（如Supelclean

 

ENVI-CarbSPETubes，3ml活性炭小柱），用醋酸乙酯5ml預洗〕上，置多功能真空樣品處理器上，用正己烷﹣醋酸乙酯（1:1）的混合液5ml洗脫,收集洗脫液,置氮吹儀上濃縮至近干，精密加入醋酸乙酯1ml使溶解，即得。

 

4、測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1μl，分別注入氣相色譜儀，按外標法計算供試品中12種有機磷農(nóng)藥殘留量。